Elución -Elution

columna de cromatografía

En química analítica y orgánica , la elución es el proceso de extracción de un material de otro por lavado con un solvente; como en el lavado de resinas de intercambio iónico cargadas para eliminar los iones capturados.

En un experimento de cromatografía de líquidos , por ejemplo, un analito generalmente se adsorbe o se "une" a un adsorbente en una columna de cromatografía de líquidos. El adsorbente, una fase sólida (fase estacionaria), es un polvo que recubre un soporte sólido. Basado en la composición de un adsorbente, puede tener diferentes afinidadespara "aferrarse" a otras moléculas, formando una película delgada en la superficie de sus partículas. Entonces, la elución es el proceso de eliminar analitos del adsorbente haciendo pasar un solvente, llamado "eluyente", más allá del complejo adsorbente/analito. A medida que las moléculas de solvente "eluyen" o viajan a través de la columna de cromatografía, pueden pasar por el complejo adsorbente/analito o pueden desplazar el analito uniéndose al adsorbente en su lugar. Después de que las moléculas de solvente desplacen el analito, el analito se puede sacar de la columna para su análisis. Esta es la razón por la cual, cuando la fase móvil sale de la columna, normalmente fluye hacia un detector o se recolecta para el análisis de composición.

Predecir y controlar el orden de elución es un aspecto clave de los métodos de cromatografía en columna.

serie eluotrópica

Una serie eluotrópica es una lista de varios compuestos en orden de poder eluyente para un adsorbente dado . El "poder de elución" de un solvente es en gran medida una medida de qué tan bien el solvente puede "arrancar" un analito del adsorbente al que está unido. Esto sucede a menudo cuando el eluyente se adsorbe en la fase estacionaria, desplazando al analito. Estas series son útiles para determinar los disolventes necesarios para la cromatografía de compuestos químicos. Normalmente, una serie de este tipo progresa desde disolventes no polares, como el n-hexano , hasta disolventes polares, como el metanol o el agua . El orden de los solventes en una serie eluotrópica depende tanto de la fase estacionaria como del compuesto utilizado para determinar el orden.

Fuerza de adsorción (menos fuertemente adsorbido → más fuertemente adsorbido)
hidrocarburos saturados; haluros de alquilo hidrocarburos insaturados; haluros de alquenilo Hidrocarbonos aromáticos; haluros de arilo Hidrocarburos polihalogenados Éteres ésteres Aldehídos y cetonas alcoholes Ácidos y bases (aminas)
Poder de elución (menor poder de elución → mayor poder de elución)
Hexano o pentano ciclohexano Benceno diclorometano Cloroformo Éter (anhidro) Acetato de etilo (anhidro) Acetona (anhidra) metanol Etanol piridina Ácido acético Agua

eluyente

El eluyente o eluyente es la porción "portadora" de la fase móvil. Mueve los analitos a través del cromatógrafo . En cromatografía líquida , el eluyente es el solvente líquido; en cromatografía de gases , es el gas portador.

eluato

El eluato es el material analito que emerge del cromatógrafo . Específicamente incluye tanto los analitos como los solutos que pasan a través de la columna, mientras que el eluyente es solo el portador.

Tiempo de elución y volumen de elución

El " tiempo de elución" de un soluto es el tiempo entre el comienzo de la separación (el momento en que el soluto entra en la columna) y el momento en que el soluto eluye. De la misma manera, el volumen de elución es el volumen de eluyente necesario para provocar la elución. En condiciones estándar para una mezcla conocida de solutos en una determinada técnica, el volumen de elución puede ser información suficiente para identificar los solutos. Por ejemplo, una mezcla de aminoácidos puede separarse mediante cromatografía de intercambio iónico . Bajo un conjunto particular de condiciones, los aminoácidos eluirán en el mismo orden y en el mismo volumen de elución.

elución de anticuerpos

La elución de anticuerpos es el proceso de eliminación de anticuerpos que están adheridos a sus objetivos, como la superficie de los glóbulos rojos . Las técnicas incluyen el uso de calor, ultrasonido, ácidos o solventes orgánicos. Ningún método único es el mejor en todas las situaciones.

Ver también

Referencias

enlaces externos